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使用固相萃取方法進行樣品凈化處理效果不理想怎么辦?

點擊次數(shù):1477 更新時間:2020-08-05

   使用固相萃取方法進行樣品凈化處理效果不理想怎么辦?

  固相萃取是基于色譜分離的樣品前處理方法,是近年來應(yīng)用較為普遍成熟的樣品預(yù)處理方法。固相萃取凈化效果不理想應(yīng)怎樣改善?建議從以下幾點考慮:
  1、凈化模式的改進
  通常而言采用保留目標(biāo)化合物的模式比保留雜質(zhì)的模式凈化效果好,如果正在分析的項目為某一種或某一類化合物分析,好是采用保留目標(biāo)化合物的凈化模式;舉一個簡單的例子,同樣是分析蔬菜中的多菌靈和噻菌靈(一類堿性農(nóng)藥),使用陽離子交換柱可以專一性地保留這些農(nóng)藥,使它們基本與干擾物*分離,而使用正相吸附劑或石墨化炭黑進行保留干擾物的操作僅能把主要的干擾物除去,仍有較多干擾物存留。
  另外,如果不止一種SPE柱可用于目標(biāo)化合物的凈化時,應(yīng)挑選選擇性好的吸附劑;選擇性方面,離子交換>正相>反相。
  2、淋洗液和洗脫液的優(yōu)化
  對于反相模式和正相模式,應(yīng)在不影響回收率的前提下,增大淋洗液洗脫的強度并降低洗脫液的洗脫強度。
  對于反相模式,可將目標(biāo)化合物的水溶液上樣,然后依次用5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%的甲醇水溶液洗脫,分別收集洗脫液分析,建立淋洗曲線,找出目標(biāo)化合物被洗脫時的溶劑體系,淋洗液中甲醇的含量應(yīng)稍低于目標(biāo)化合物恰好被洗脫時的溶劑體系,而洗脫液中甲醇的含量應(yīng)稍高于目標(biāo)化合物恰好被*洗脫時的溶劑體系;當(dāng)純甲醇不能洗脫目標(biāo)化合物時,應(yīng)試驗甲醇-甲基叔丁基醚混合溶液的洗脫曲線;對于某些既不溶于水也不溶于甲醇的離子型化合物,可以在溶劑體系中加入酸或堿。固相萃取系統(tǒng)
  對于正相體系,可將目標(biāo)化合物的正己烷溶液上樣,然后依次用5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%的正己烷甲基叔丁基醚溶液洗脫,分別收集洗脫液分析,建立淋洗曲線,找出目標(biāo)化合物被洗脫時的溶劑體系,淋洗液中甲基叔丁基醚的含量應(yīng)稍低于目標(biāo)化合物恰好被洗脫時的溶劑體系,而洗脫液中甲基叔丁基醚的含量應(yīng)稍高于目標(biāo)化合物恰好被*洗脫時的溶劑體系。
  3、對SPE柱進行合理的處理
  SPE柱中的吸附劑可能存在少量干擾物,有效地活化可以避免這些干擾物進入洗脫液,活化溶液應(yīng)選擇整個操作中洗脫強度強的溶劑體系;在反相模式中,從樣品溶液到洗脫液主要涉及0%-100%甲醇水溶液,所以活化溶液應(yīng)選純甲醇,當(dāng)目標(biāo)化合物需要用甲醇-甲基叔丁基醚混合液洗脫時,活化溶液應(yīng)選甲基叔丁基醚;在正相模式中,從樣品溶液到洗脫液主要涉及0%-100%正己烷-甲基叔丁基醚溶液,所以活化溶液應(yīng)選純甲基叔丁基醚。

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